Makeda Robinson, MD, PhD, é uma especialista em doenças infecciosas que atualmente estuda as interações vírus-hospedeiro em vírus emergentes na Universidade de Stanford. A cada semana, o Dr. Robinson analisa tópicos complicados do COVID-19 e aborda questões urgentes de saúde pública.
Com a escassez massiva de testes, testes ineficazes e uma incapacidade de implementar estratégias de teste generalizadas, os EUA têm sido atormentados por problemas relacionados a testes desde o início desta pandemia. No entanto, à medida que a tecnologia alcança as informações em evolução que cercam o SARS-CoV-2, os cientistas estão começando a desenvolver testes inovadores, rápidos e precisos que podem ajudar a conter a disseminação do COVID-19.
Um desses testes, o SalivaDirect, recebeu a Autorização de Uso de Emergência (EUA) da Food and Drug Administration (FDA) dos EUA em agosto e tem o potencial de mudar a infraestrutura dos procedimentos de teste dos EUA. Como funciona este teste? Como ele se compara a outros testes que receberam EUA? O Dr. Robinson conversou com a Verywell Health sobre as opções de teste mais recentes.
Verywell Health: Como funciona o SalivaDirect e por que recebeu tanta atenção recentemente?
Dr. Robinson: O SalivaDirect exige que os usuários colham sua própria saliva em um recipiente estéril, onde é enviada a um laboratório para processamento. (Nota do Editor: De acordo com o FDA, a amostra deve ser coletada sob a supervisão de um médico.) Uma das razões pelas quais este teste recebeu tanta atenção é porque é rápido, barato e fácil.
Para tornar este teste mais amplamente disponível, os pesquisadores da Escola de Saúde Pública de Yale testaram o SalivaDirect usando várias máquinas e descobriram que seu protocolo não precisava da máquina de um fornecedor específico para funcionar de maneira eficiente. Isso significa que os laboratórios interessados em usar esse teste provavelmente não precisariam comprar nenhum equipamento especial para executá-lo. Esta é uma questão importante quando se pensa nos gargalos da cadeia de suprimentos.
Esses ajustes inovadores levam à redução de custos e tempos de resposta mais rápidos. Com o SalivaDirect, buscamos resultados em menos de 24 horas e um custo por teste de menos de US $ 10 para o público. O custo é uma questão importante quando você está pensando em expandir os testes, especialmente em países de renda média ou baixa que podem querer fazer testes populacionais mais amplos. À medida que buscamos intensificar os testes de diagnóstico para incluir pessoas sem sintomas, o SalivaDirect pode ser uma ótima opção.
Verywell Health: Como os pesquisadores conseguiram fazer um teste mais rápido e barato? O que há de diferente em sua tecnologia?
Dr. Robinson: Os pesquisadores que criaram o teste fizeram duas modificações principais nos testes de PCR padrão.
Primeiro, eles não incluíram compostos específicos que são comumente usados durante a coleta de amostras, o que reduziu significativamente o custo de produção do SalivaDirect. Esses conservantes de ácido nucléico são normalmente adicionados ao recipiente de coleta para melhorar a integridade do RNA de sua amostra. Com o SalivaDirect, os pesquisadores avaliaram se os conservantes eram necessários durante o teste de SARS-CoV-2 e não encontraram diferenças significativas na precisão do teste quando foram excluídos. Na verdade, eles encontraram uma melhora na detecção após sete dias em temperaturas quentes.
A segunda coisa que eles modificaram - que pode ter uma influência maior no resultado do teste - é a etapa de extração de RNA. Esta etapa é usada para concentrar e extrair RNA dos espécimes de amostra para melhorar a precisão do teste. A maioria dos nossos atuais testes de diagnóstico de PCR para SARS-CoV-2 usa essa etapa, que requer kits especiais de extração de ácido nucleico. Infelizmente, tivemos uma escassez desses kits durante a pandemia. O protocolo SalivaDirect elimina a etapa de extração de RNA.
Para eliminar essa etapa, mas manter a precisão, os cientistas que criaram o SalivaDirect substituíram a extração de RNA pela adição de uma enzima, a Proteinase K. A Proteinase K pode inativar proteínas que podem degradar o RNA nas amostras.
Verywell Health: Como o SalivaDirect se compara a outros testes diagnósticos de saliva para SARS-CoV-2?
Dr. Robinson: Acho que, em parte, o SalivaDirect se destaca de outros testes de diagnóstico por sua melhoria em custo e acessibilidade. Em abril, o FDA emitiu seu primeiro EUA para um teste de saliva criado pelo Rutgers Clinical Genomics Laboratory. Este está atualmente disponível comercialmente, mas é vendido por US $ 150, portanto, há uma grande diferença de preço entre ele e o SalivaDirect. O teste de Rutgers, no entanto, está mais alinhado com os testes de PCR tradicionais, porque os médicos realizam uma etapa de extração de RNA.
Verywell Health: Como o SalivaDirect se compara aos cotonetes de nasofaringe padrão?
Dr. Robinson: Uma diferença importante é que você mesmo pode coletar uma amostra de saliva. Durante um esfregaço nasofaríngeo, você pode ter tosse e espirros aumentados, colocando em risco o profissional de saúde que administra o teste.
O que é um esfregaço nasofaríngeo?
Um esfregaço nasofaríngeo coleta uma amostra do fundo do nariz, alcançando a parte posterior da garganta.
Os testes de saliva também podem ser um pouco mais consistentes. Os resultados de um teste de esfregaço nasofaríngeo podem depender da pessoa que está obtendo a amostra. O fator humano pode desempenhar um papel importante se o cotonete não for colocado a uma profundidade suficiente para obter uma amostra suficiente.
Além disso, muitas pessoas acham desconfortável fazer um teste de cotonete. Portanto, um teste de saliva pode ser benéfico se mais pessoas estiverem dispostas a fazer o teste devido à facilidade e conforto.
Verywell Health: Você acha que os testes de saliva podem substituir os testes de esfregaço nasofaríngeo?
Dr. Robinson: Acho que os dois testes têm um lugar no setor de saúde.
Os testes de saliva podem ser mais úteis em pacientes ambulatoriais com pessoas que apresentam sintomas leves. Mas os pacientes que já estão hospitalizados podem ter mais dificuldade em produzir saliva suficiente. Problemas como boca seca e aumento da produção de muco ou sangue podem inibir o procedimento do teste.
Sensibilidade vs. Especificidade
- A sensibilidade é a porcentagem de pessoas infectadas que realmente apresentam um resultado de teste positivo.
- A especificidade é a porcentagem de pessoas que sãonãoinfectados que realmente apresentam um resultado de teste negativo.
Verywell Health: Quais são os níveis de sensibilidade e especificidade do SalivaDirect?
Dr. Robinson: O teste SalivaDirect parece ter uma ligeira redução na sensibilidade em comparação com o teste PCR padrão porque pula a etapa de extração de RNA. No entanto, isso era de se esperar. Essa redução na sensibilidade levará a mais falsos negativos. Três dos 41 pacientes positivos não serão atendidos pelo SalivaDirect.
Para determinar a especificidade, os pesquisadores analisaram se essa estratégia de teste levaria a qualquer reatividade cruzada para a gripe. Esse teste levaria a resultados falso-positivos em pessoas com gripe, mas sem SARS-CoV-2? Eles testaram amostras de cepas de gripe dos dois anos anteriores e descobriram que seu teste não apresentou reação cruzada com essas cepas de gripe, o que significa que é altamente específico para SARS-CoV-2.
Verywell Health: Quais outros testes de diagnóstico aprovados você acha que podem mudar o jogo?
Dr. Robinson: O llumina (COVIDSeq) é outra abordagem de teste que tem seus próprios benefícios exclusivos. Ele pode agrupar até 3.000 amostras de uma vez, produzindo resultados em 24 horas. [Pesquisadores] estão relatando uma sensibilidade de 98% e especificidade de 97%.
Este teste usa swabs nasofaríngeos e orofaríngeos, não saliva. No entanto, ele se destaca de outros testes, pois permite que os pesquisadores sequenciem o vírus e pode fornecer informações sobre as cadeias de transmissão e as taxas de mutação. À medida que o vírus SARS-CoV-2 passa mais tempo interagindo com o sistema imunológico humano, ele tentará encontrar maneiras de escapar de nossas defesas por mutação. Essas mutações são algo que precisamos ficar de olho ao pensar sobre vacinas e terapêuticas e podem ser monitoradas por meio de tecnologia de sequenciamento.
Uma limitação dessa estratégia de teste é que podem surgir problemas devido à necessidade de um equipamento específico de um fornecedor específico, o que pode levar a problemas na cadeia de suprimentos.
O teste DETECTR é outra abordagem de teste de diagnóstico com EUA do FDA. Ele usa várias tecnologias avançadas para reduzir o tempo de resposta para menos de uma hora, o que pode ser verdadeiramente transformador.
Verywell Health: Como a abundância e acessibilidade dos testes rápidos podem ajudar a informar as políticas de saúde pública e os esforços de contenção?
Dr. Robinson: Acredito que atualmente temos as ferramentas necessárias para conter esse vírus. Medidas de saúde pública por meio de esforços individuais de uso de máscara e distanciamento social, bem como testes diagnósticos generalizados e rastreamento de contato, mostraram seu poder para proteger nossas comunidades da transmissão de COVID-19.
Vimos que essas medidas podem fazer uma enorme diferença em outros países como a Coreia do Sul e Taiwan, que se concentraram desde o início nos esforços de contenção e mantiveram o número de casos relativamente baixo. Os testes caseiros e rápidos podem nos ajudar em nossos esforços e são outra ferramenta potencial na caixa de ferramentas para reabertura de maneira segura.
Por exemplo, como algumas empresas estão começando a pensar sobre a logística de ter um subconjunto de funcionários de volta ao escritório, ter protocolos de teste rápido em casa pode nos permitir começar a fazer isso de uma maneira muito mais segura. Idealmente, construiríamos sobre o trio de higiene das mãos, máscaras e distanciamento social, adicionando testes rápidos em casa e rastreamento de contato baseado em tecnologia mais avançada. Essas abordagens também podem ser aplicadas ao ambiente escolar.
Dado o impacto extraordinário desta pandemia, às vezes sinto que há uma sensação de impotência, mas acredito que este é o momento de investir em nossas comunidades e começar a abrir nossos olhos para a necessidade de investimentos fundamentais em infraestrutura de saúde pública. Não estamos mais seguros contra o próximo vírus sem nome do que no início de 2020.
Verywell Health: Muitos desses testes rápidos baratos demonstraram ter menor sensibilidade. Você acha que é mais importante ter testes de alta precisão ou testes acessíveis?
Dr. Robinson: Muito disso depende do que você está tentando realizar com os testes de diagnóstico. Usamos testes de diagnóstico para responder a várias perguntas, incluindo se alguém tem uma infecção aguda, se se recuperou ou se alguém tem uma infecção assintomática.
Também usamos esses testes para obter dados de toda a população para entender melhor quem já foi infectado. Portanto, dependendo da pergunta que você está fazendo, você pode querer um teste extraordinariamente sensível ou um teste com melhor escalabilidade, ou seja, um que seja barato e fácil de usar e que possa ser aplicado a populações maiores. Eu não diria que um é mais importante do que o outro, mas que o tipo de teste deve ser adaptado à pergunta que você está tentando responder.
Eu realmente acho que testes rápidos em casa podem ser úteis para iluminar a caixa preta daqueles que estão “infectados sem saber” ou casos assintomáticos. Como agora temos bons testes de PCR padrão precisos, acho que o foco deve ser validar ainda mais esses testes mais rápidos e baratos e encontrar maneiras de implementá-los de maneira simplificada.
Verywell Health: Existem testes que podem detectar simultaneamente COVID-19 e influenza?
Dr. Robinson: Sim. Em julho, o FDA emitiu um EUA para o teste CDC Influenza SARS-CoV-2 (Flu SC2) Multiplex Assay. Este teste é um ensaio RT-PCR capaz de diferenciar entre o SARS-CoV-2 e dois tipos de influenza: o vírus influenza A e o vírus influenza B.
Desenvolver esses tipos de testes antes da temporada de gripe é extremamente importante. À medida que avançamos no outono e começamos a aprender como a reabertura de escolas e o retorno ao trabalho administrativo afetam a pandemia, testes como este ajudarão a informar regimes de tratamento eficazes. Esses testes também nos ajudarão a entender a sobreposição de sintomatologia e como as coinfecções podem ser comuns.
Verywell Health: Qual você acha que deve ser a próxima etapa do teste?
Dr. Robinson: Acho que melhorar o acesso às instalações de teste e reduzir o tempo de resposta são as próximas etapas cruciais em nossa abordagem ao SARS-CoV-2.
Precisamos pensar estrategicamente sobre quem e onde estamos testando e criar centros de testes diagnósticos em locais que foram duramente atingidos pelo vírus. Educar ainda mais as comunidades sobre o processo de teste e incentivar as pessoas que podem não estar em alto risco, mas interagir com populações de alto risco, como aquelas que vivem em casas multigeracionais, pode ter um impacto amplo e profundo no controle da propagação do vírus.
