O objetivo e as etapas envolvidas em um teste de cariótipo

Se o seu médico recomendou um teste de cariótipo para você ou seu filho, ou após uma amniocentese, o que esse teste envolve? Quais condições um cariótipo pode diagnosticar, quais são as etapas envolvidas na realização dos testes e quais são suas limitações?

O que é um teste de cariótipo?

Um cariótipo é uma fotografia dos cromossomos em uma célula. Os cariótipos podem ser obtidos de células sanguíneas, células da pele fetal (do líquido amniótico ou da placenta) ou células da medula óssea.

Condições diagnosticadas com um teste de cariótipo

Os cariótipos podem ser usados ​​para rastrear e confirmar anormalidades cromossômicas, como a síndrome de Down e a síndrome do olho de gato, e existem vários tipos diferentes de anormalidades que podem ser detectadas.

Anormalidades cromossômicas:

• Trissomias em que existem três cópias de um dos cromossomos, em vez de duas
• Monossomias em que apenas uma cópia (em vez de duas) está presente
• Deleções cromossômicas em que parte de um cromossomo está faltando
• Translocações cromossômicas em que uma parte de um cromossomo é anexada a outro cromossomo (e vice-versa em translocações balanceadas).

Exemplos de trissomias incluem:

• Síndrome de Down (trissomia 21)
• Síndrome de Edward (trissomia 18)
• Síndrome de Patau (trissomia 13)
• Síndrome de Klinefelter (XXY e outras variações) - a síndrome de Klinefelter ocorre em 1 em 500 recém-nascidos do sexo masculino
• Síndrome do Triplo X (XXX)

Um exemplo de monossomia inclui:

• Síndrome de Turner (X0) ou monossomia de X - Aproximadamente 10% dos abortos espontâneos do primeiro trimestre são devido à síndrome de Turner, mas esta monossomia está presente em apenas cerca de 1 em 2.500 nascidos vivos do sexo feminino

Exemplos de deleções cromossômicas incluem:

• Síndrome de Cri-du-Chat (falta do cromossomo 5)
• Síndrome de Williams (cromossomo 7 ausente)

Translocações - Existem muitos exemplos de translocações, incluindo a síndrome de Down de translocação. As translocações robertsonianas são bastante comuns, ocorrendo em cerca de 1 em cada 1000 pessoas.

Mosaicismo é uma condição na qual algumas células do corpo apresentam uma anomalia cromossômica, enquanto outras não. Por exemplo, síndrome de Down em mosaico ou trissomia em mosaico 9. A trissomia 9 completa não é compatível com a vida, mas a trissomia em mosaico 9 pode resultar em nascimento vivo.

Quando estiver feito

Existem muitas situações em que um cariótipo pode ser recomendado pelo seu médico. Isso pode incluir:

• Bebês ou crianças com condições médicas que sugerem uma anomalia cromossômica que ainda não foi diagnosticada.
• Adultos com sintomas sugestivos de uma anormalidade cromossômica (por exemplo, homens com doença de Klinefelter podem não ser diagnosticados até a puberdade ou idade adulta). Alguns dos distúrbios da trissomia em mosaico também podem não ser diagnosticados.
• Infertilidade: um cariótipo genético pode ser feito para infertilidade. Como observado acima, algumas anormalidades cromossômicas podem não ser diagnosticadas até a idade adulta. Uma mulher com síndrome de Turner ou um homem com uma das variantes da síndrome de Klinefelter podem não estar cientes da condição até que estejam lidando com a infertilidade.
• Teste pré-natal: em alguns casos, como translocação na síndrome de Down, a condição pode ser hereditária e os pais podem ser testados se uma criança nasceu com síndrome de Down. (É importante notar que na maioria das vezes a síndrome de Down não é um distúrbio hereditário, mas sim uma mutação fortuita.)
• Natimorto: um cariótipo geralmente é feito como parte do teste após um natimorto.
• Abortos espontâneos recorrentes: um cariótipo parental de abortos recorrentes pode dar pistas sobre as razões para essas perdas recorrentes devastadoras. Acredita-se que as anormalidades cromossômicas, como a trissomia 16, sejam a causa de pelo menos 50% dos abortos espontâneos.
• Leucemia: o teste do cariótipo também pode ser feito para ajudar a diagnosticar leucemias, por exemplo, procurando o cromossomo Filadélfia encontrado em algumas pessoas com leucemia mielóide crônica ou leucemia linfocítica aguda.

Etapas Envolvidas

Um teste de cariótipo pode soar como um simples exame de sangue, o que faz muitas pessoas se perguntarem por que demora tanto para obter os resultados. Este teste é bastante complexo após a coleta. Vamos dar uma olhada nessas etapas para que você possa entender o que está acontecendo durante o tempo que você está esperando pelo teste.

1. Coleta de Amostras

A primeira etapa na realização de um cariótipo é coletar uma amostra. Em recém-nascidos, uma amostra de sangue contendo glóbulos vermelhos, glóbulos brancos, soro e outros fluidos é coletada. Um cariótipo será feito nas células brancas do sangue que estão se dividindo ativamente (um estado conhecido como mitose). Durante a gravidez, a amostra pode ser líquido amniótico coletado durante uma amniocentese ou um pedaço da placenta coletado durante um teste de amostra de vilosidades coriônicas (CVS). O líquido amniótico contém células da pele fetal que são usadas para gerar um cariótipo.

2. Transporte para o Laboratório

Os cariótipos são realizados em um laboratório específico denominado laboratório de citogenética - um laboratório que estuda cromossomos. Nem todos os hospitais possuem laboratórios de citogenética. Se o seu hospital ou clínica médica não tiver seu próprio laboratório de citogenética, a amostra de teste será enviada para um laboratório especializado em análise de cariótipo.A amostra de teste é analisada por tecnólogos citogenéticos especialmente treinados, Ph.D. citogeneticistas ou geneticistas médicos.

3. Separando as células

Para analisar os cromossomos, a amostra deve conter células que estão se dividindo ativamente. No sangue, os glóbulos brancos se dividem ativamente. A maioria das células fetais também se divide ativamente. Assim que a amostra chega ao laboratório de citogenética, as células que não se dividem são separadas das células que se dividem usando produtos químicos especiais.

4. Células em crescimento

A fim de ter células suficientes para analisar, as células em divisão são cultivadas em meios especiais ou uma cultura de células. Este meio contém substâncias químicas e hormônios que permitem que as células se dividam e se multipliquem. Esse processo de cultivo pode levar de três a quatro dias para células sanguíneas e até uma semana para células fetais.

5. Sincronizando células

Os cromossomos são uma longa cadeia de DNA humano. Para ver os cromossomos ao microscópio, os cromossomos devem estar em sua forma mais compacta em uma fase de divisão celular (mitose) conhecida como metáfase. Para que todas as células cheguem a esse estágio específico de divisão celular, as células são tratadas com uma substância química que interrompe a divisão celular no ponto em que os cromossomos são mais compactos.

6. Liberando os cromossomos de suas células

Para ver esses cromossomos compactos em um microscópio, os cromossomos precisam estar fora das células brancas do sangue. Isso é feito tratando os glóbulos brancos com uma solução especial que os faz explodir. Isso é feito enquanto as células estão em uma lâmina microscópica. Os restos de resíduos das células brancas do sangue são removidos, deixando os cromossomos presos à lâmina.

7. Coloração dos cromossomos

Os cromossomos são naturalmente incolores. A fim de distinguir um cromossomo de outro, um corante especial denominado corante Giemsa é aplicado à lâmina. O corante Giemsa cora regiões de cromossomos que são ricas em bases adenina (A) e timina (T). Quando manchados, os cromossomos parecem cordas com faixas claras e escuras. Cada cromossomo tem um padrão específico de faixas claras e escuras que permitem ao citogeneticista distinguir um cromossomo do outro. Cada banda escura ou clara abrange centenas de genes diferentes.

8. Análise

Uma vez que os cromossomos são corados, a lâmina é colocada sob o microscópio para análise. Uma foto é então tirada dos cromossomos. Ao final da análise, o número total de cromossomos será determinado e os cromossomos organizados por tamanho.

9. Contando Cromossomos

A primeira etapa da análise é contar os cromossomos. A maioria dos humanos possui 46 cromossomos. Pessoas com síndrome de Down têm 47 cromossomos. Também é possível que as pessoas tenham cromossomos ausentes, mais de um cromossomo extra ou uma porção de um cromossomo ausente ou duplicada. Observando apenas o número de cromossomos, é possível diagnosticar diferentes condições, incluindo a síndrome de Down.

10. Classificação de cromossomos

Depois de determinar o número de cromossomos, o citogeneticista começará a classificar os cromossomos. Para classificar os cromossomos, um citogeneticista comparará o comprimento dos cromossomos, a colocação dos centrômeros (as áreas onde as duas cromátides estão unidas) e a localização e os tamanhos das bandas G. Os pares de cromossomos são numerados do maior (número 1) ao menor (número 22). Existem 22 pares de cromossomos, chamados autossomos, que correspondem exatamente. Existem também os cromossomos sexuais, as mulheres têm dois cromossomos X, enquanto os homens têm um X e um Y.

11. Olhando para a estrutura

Além de examinar o número total de cromossomos e os cromossomos sexuais, o citogeneticista também examinará a estrutura dos cromossomos específicos para se certificar de que não há material ausente ou adicional, bem como anormalidades estruturais como translocações. Uma translocação ocorre quando uma parte de um cromossomo é anexada a outro cromossomo. Em alguns casos, duas peças de cromossomos são trocadas (uma translocação balanceada) e outras vezes uma peça extra é adicionada ou faltando em um único cromossomo.

12. O Resultado Final

No final, o cariótipo final mostra o número total de cromossomos, o sexo e quaisquer anormalidades estruturais com cromossomos individuais. Uma imagem digital dos cromossomos é gerada com todos os cromossomos organizados por número.

Limites do teste de cariótipo

É importante observar que, embora o teste de cariótipo possa fornecer muitas informações sobre os cromossomos, esse teste não pode dizer se mutações genéticas específicas, como aquelas que causam fibrose cística, estão presentes. Seu conselheiro genético pode ajudá-lo a entender o que os testes de cariótipo podem dizer e o que não podem. Mais estudos são necessários para avaliar o possível papel das mutações genéticas em doenças ou abortos espontâneos.

Também é importante observar que às vezes o teste de cariótipo pode não ser capaz de detectar algumas anormalidades cromossômicas, como quando o mosaicismo placentário está presente.

Atualmente, o teste do cariótipo no ambiente pré-natal é bastante invasivo, exigindo amniocentese ou biópsia de vilo corial. No entanto, avaliar o DNA livre de células em uma amostra de sangue da mãe agora é comum como uma alternativa muito menos invasiva para o diagnóstico pré-natal de anormalidades genéticas em um feto.

Uma palavra de Verywell

Enquanto espera pelos resultados do cariótipo, você pode se sentir muito ansioso, e as semanas que leva para obter os resultados podem parecer eras. Aproveite para confiar em seus amigos e familiares. Aprender sobre algumas das condições associadas a cromossomos anormais também pode ser útil. Embora muitas das doenças diagnosticadas com cariótipo possam ser devastadoras, muitas pessoas que vivem com essas doenças têm uma excelente qualidade de vida.